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AAT Bioquest 21180 Cell Meter™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒 1000 Tests,產品簡介:產品品牌:AAT Bioquest產品貨號:21180產品名稱:Cell Meter™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒產品規格:1000 TestsAAT Bioquest 熒光細胞內pH測定試劑盒
聯系電話:13269192326
品牌 | AAT Bioquest | 貨號 | 21180 |
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規格 | 1000 Tests | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | Cell Meter™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒 | 應用領域 | 醫療衛生,環保,化工,生物產業,制藥 |
AAT Bioquest 21180 Cell Meter™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒
我們北京云肽生物科技有限公司作為AAT Bioquest公司的特約經銷商為客戶提供,正規進口,保證原裝正品,貨期穩定,折扣好的服務標準。
AAT Bioquest 熒光細胞內pH測定試劑盒
美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest,Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發及藥物開發的科學家研發、生產和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域,包括吸收(顏色),熒光和發光技術。AAT Bioquest的產品幫助 quan 世 jie 的科學家和生物醫藥研究者更好的了解生物化學,免疫學,細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest會不斷介紹新產品,快速的豐富各個領域的產品。
AAT Bioquest 21180 Cell Meter™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒 1000 Tests,產品簡介:
產品品牌:AAT Bioquest
產品貨號:21180
產品名稱:Cell Meter™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒
產品規格:1000 Tests
AAT Bioquest 熒光細胞內pH測定試劑盒
AAT Bioquest 21180 Cell Meter™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒 1000 Tests,產品說明:
細胞內pH值變化與多種生理和病理過程有關,包括細胞增殖,細胞凋亡,受精,惡性腫瘤,多藥耐藥性,離子轉運,溶酶體貯積癥和阿爾茨海默病。細胞計™熒光法細胞內pH測定試劑盒利用AAT Bioquest專有的熒光指示劑來測量細胞內pH值的相對變化。它是一種均質的動力學活細胞熒光測定,采用標準程序或酸負荷程序。標準方案設計用于測量感興趣的治療靶點,治療時細胞內pH值降低。“酸負荷"程序旨在測量與GPCR活化或生長因子活性引起的細胞代謝變化相關的細胞內pH值的增加。通過“酸負荷"程序,在熒光pH染料以最小體積加載到細胞中后,加入氯化銨溶液。該“酸加載"步驟之后在相對大體積(~4X)的緩沖液中添加激動劑。突然的體積變化引發細胞中的氨(NH3)外排,導致細胞內pH值迅速降低,從而降低熒光信號。激動劑對細胞內pH后續恢復的影響通過相對熒光信號增加來測量。
平臺
熒光酶標儀
Excitation:490納米
Emission:535納米
Cutoff:515納米
推薦板:黑色墻壁/透明底部
組件
組件A:RatioWorks™ BCFL,AM 1瓶
組件B:10X Pluronic F127 Plus 1 瓶 (10 mL)
組分C:HHBS(Hanks緩沖液,含20 mM肝素) 1 瓶 (100 mL)
組分 D:50 mM 準備使用™probenecid 1 瓶 (10 mL)
用于標準電池負載(單板)
1. 在生長培養基中制備細胞
2. 加入等體積的RatioWorks™ BCFL,AM染料加工溶液
3. 在37°C孵育1小時
4. 在Ex/Em= 490/535 nm(截止= 515 nm)下讀取熒光,加入50 μL/孔化合物(或比率為500/530 nm和440/530 nm)
協議摘要
用于酸負荷(一個 96 孔板)
1. 在生長培養基中制備細胞
2. 去除生長培養基
3. 添加 RatioWorks™ BCFL、AM 染料工作溶液(50 μL/孔/96 孔板)
4. 在 37°C 下孵育 1 小時
5. 添加 220 mM NH4氯(5 μL/孔)
6. 在室溫下孵育 15 分鐘
7. 在Ex/Em= 490/535 nm(截止= 515 nm)下讀取熒光,加入200 μL/孔化合物(或比率為500/530 nm和440/530 nm)
重要事項:在開始實驗之前,在室溫下解凍所有試劑盒組分。
儲備溶液的制備
除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。避免反復凍融循環。
RatioWorks™ BCFL, AM 庫存解決方案
將 200 μL DMSO 加入 RatioWorks BCFL、AM(組分 A)的小瓶中,并充分混合以制成 RatioWorks™™ BCFL、AM 儲備溶液。
注意 20 μL 重構 RatioWorks™ BCFL、AM 儲備溶液足以用于 1 板標準細胞負載。10 μL 重構 RatioWorks™ BCFL、AM 儲備溶液足以用于 1 板酸負荷。RatioWorks™ BCFL,AM儲備溶液可以儲存在≤-20oC 如果管子密封嚴密,則一個月。避光。
工作溶液的制備
1. 用于標準電池負載(單板)
1. 將 1 mL 的 10X Pluronic F127 Plus(組分 B)加入 9 mL 的 HHBS(組分 C)中,充分混合制成 1X 測定緩沖液。
注意對于需要丙磺shu上樣的細胞(例如CHO細胞),稀釋50 mM準備以™ 1至5 mM的濃度使用丙磺shu(組分D)(CHO細胞 shou xuan 5 mM)。
2. 將 20 μL 重構的 RatioWorks BCFL、AM 儲備溶液加入 10 mL 的 1X 測定緩沖液中,充分混合,制成 RatioWorks™™ BCFL、AM 染料工作溶液。該RatioWorks™ BCFL,AM染料工作溶液在室溫下可穩定至少2小時。
2. 用于酸負荷(一個 96 孔板)
1. 將 1 mL 的 10X Pluronic F127 Plus(組分 B)加入 4 mL 的 HHBS(組分 C)中,充分混合制成 1X 測定緩沖液。
注意對于需要丙磺shu上樣的細胞(例如CHO細胞),稀釋50 mM準備以™ 0.5至2.5mM的濃度使用丙磺shu(組分D)(CHO細胞 shou xuan 2.5 mM)。
2. 將 10 μL 重構的 RatioWorks BCFL、AM 儲備溶液加入 5 mL 的 1X 測定緩沖液中,充分混合,制成 RatioWorks™™ BCFL、AM 染料工作溶液。該RatioWorks™ BCFL,AM染料工作溶液在室溫下可穩定至少2小時。
實驗方案樣本
運行標準細胞載量pH測定
1. 將 100 μL/孔(96 孔板)或 25 μL/孔(384 孔板)RatioWorks™ BCFL、AM 染料工作溶液添加到細胞板中。
注意 如果您的化合物干擾血清,請務 bi yong HHBS 緩沖液替換生長培養基(100 孔板為 96 μL/孔,染料上樣前為 25 孔板為 384 μL/孔)。
2. 將染料加載板在細胞培養箱中孵育30分鐘,然后在室溫下再孵育板30分鐘。
注意如果測定需要37°C,請立即進行實驗,無需進一步室溫孵育。
3. 使用 HHBS 或所需的緩沖液制備復合板。
4. 通過監測Ex / Em = 490 / 535 nm(截止= 515 nm)或500/530 nm和440/530 nm(截止= 515 nm)的熒光進行比率測量來運行pH測定。化合物添加量為 50 μL/孔(96 孔板)或 25 μL/孔(384 孔板)。
注意 該測定應在化合物添加后 3 至 5 分鐘內完成,但建議在測定開發期間至少收集 8 分鐘的數據。
運行酸負荷的pH測定
1. 從細胞板中取出生長培養基。
2. 將 50 μL/孔/96 孔板 RatioWorks™ BCFL、AM 染料工作溶液添加到細胞板中。
3. 將染料加載板在細胞培養箱中孵育30分鐘,然后在室溫下再孵育板30分鐘。注意:如果測定需要37°C,請立即進行實驗,無需進一步室溫孵育。
4. 加入 5 μL 220 mM NH4Cl 并將板離心 5 秒鐘。在室溫下孵育15分鐘。
注意新罕 bu shen 爾州4Cl溶液應在HHBS(組分C)中新鮮制備。
5. 使用 HHBS 或所需的緩沖液制備復合板。
6. 通過監測Ex / Em = 490 / 535 nm(截止= 515 nm)或500/530 nm和440/530 nm(截止= 515 nm)的熒光進行比率測量來運行pH測定。化合物添加量為 200 μL/孔/96 孔板。
注意 該測定應在化合物添加后 3 至 5 分鐘內完成,但建議在測定開發期間至少收集 8 分鐘的數據。
產品訂購信息:
21180 Cell Meter™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒 1000 Tests