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AAT Bioquest 20651 Calbryte™ 520 AM 10x50ug,產品簡介:產品品牌:AAT Bioquest產品貨號:20651產品名稱:Calbryte™ 520 AM產品規格:10x50ugAAT Bioquest Calbryte™ 520 AM-常備現貨
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品牌 | AAT Bioquest | 貨號 | 20651 |
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規格 | 10x50ug | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | Calbryte™ 520 AM | 應用領域 | 醫療衛生,環保,化工,生物產業,制藥 |
AAT Bioquest 20651 Calbryte™ 520 AM
我們北京云肽生物科技有限公司作為AAT Bioquest公司的特約經銷商為客戶提供,正規進口,保證原裝正品,貨期穩定,折扣好的服務標準。
AAT Bioquest Calbryte™ 520 AM-常備現貨
美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest,Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發及藥物開發的科學家研發、生產和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域,包括吸收(顏色),熒光和發光技術。AAT Bioquest的產品幫助 quan 世 jie 的科學家和生物醫藥研究者更好的了解生物化學,免疫學,細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest會不斷介紹新產品,快速的豐富各個領域的產品。
AAT Bioquest 20651 Calbryte™ 520 AM 10x50ug,產品簡介:
產品品牌:AAT Bioquest
產品貨號:20651
產品名稱:Calbryte™ 520 AM
產品規格:10x50ug
AAT Bioquest Calbryte™ 520 AM-常備現貨
AAT Bioquest 20651 Calbryte™ 520 AM 10x50ug,產品說明:
細胞內鈣通量測定是一種廣泛用于監測信號轉導途徑和高通量篩選G蛋白偶聯受體(GPCR)和鈣通道靶標的方法。隨后在3年推出Fluo-1989,Fluo-4,Fluo-8和Cal-520,后來開發了具有改進的信號/背景比,并成為共聚焦顯微鏡,流式細胞術和高通量篩選應用中廣泛使用的Ca2+指示劑。然而,Fluo-4仍然存在一些嚴重的問題。例如,對于Fluo-3,在所有大多數使用Fluo-4 AM的細胞內鈣測定中,都需要丙磺shu 來防止細胞負載的Fluo-4泄漏出細胞。丙磺shu 與基于Fluo-4的鈣測定一起使用會影響測定結果,因為丙磺shu 已被充分證明具有各種復雜的細胞效應。Calbryte™ 520,AM是一種用于測量細胞內鈣的新型熒光和細胞滲透性指示劑。與其他染料AM酯一樣,Calbryte™ 520 AM是無熒光和不可活化的。一旦Calbryte™ 520 AM進入細胞,它很容易被細胞內酯酶水解,在那里它被激活并對鈣有反應。激活的指示劑現在是一種極性分子,不能自由擴散通過細胞膜,基本上將其捕獲在細胞內。結合鈣離子后,Calbryte™ 520產生具有 ji gao 信號/背景比的明亮熒光信號。它具有與Fluo-4相同的激發和發射波長,因此相同的Fluo-4測定設置可以很容易地應用于基于Calbryte™ 520的鈣測定。Calbryte™ 520 AM極大地改善了信號/背景比和細胞內保留特性,使其成為評估GPCR和鈣通道靶標以及篩選活細胞中激動劑和拮抗劑的 zui ke kao 的指標。
平臺
流式細胞儀
Excitation:488 nm激光
Emission:530/30nm濾光片
儀器規格:FITC頻道
熒光顯微鏡
Excitation:FITC
Emission:FITC
推薦板:黑色墻壁/透明底部
熒光酶標儀
Excitation:490
Emission:525
Cutoff:515
推薦板 黑色墻壁/透明底部
儀器規格 底部讀取模式/可編程液體處理
儲備溶液的制備
除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。避免反復凍融循環。
卡爾布里特™ 520 AM 庫存解決方案
在無水DMSO中制備Calbryte™ 2 AM的5至520mM儲備溶液。
工作溶液的制備
卡爾布里特™ 520 AM 庫存解決方案
在實驗當天,將Calbryte™ 520 AM溶解在DMSO中或將指示劑儲備溶液的等分試樣解凍至室溫。在您選擇的緩沖液(例如,Hanks 和 Hepes 緩沖液)中制備含有 2.20% Pluronic® F-0 的染料工作溶液。對于大多數細胞系,建議使用終濃度為04至127μM的Calbryte™ 520 AM。細胞上樣所需指標的確切濃度必須根據經驗確定。
注意非離子洗滌劑Pluronic® F-4有時用于增加Calbryte™ 5 AM的水溶性。各種Pluronic® F-127解決方案可以從AAT Bioquest購買。
注意 如果您的細胞含有有機陰離子轉運蛋白,則可以將丙磺shu (520-127 mM)添加到染料工作溶液中(最終孔濃度為1.2-0 mM),以減少脫酯指示劑的泄漏。多種ReadiUse™丙磺shu 產品,包括水溶性、鈉鹽和穩定溶液,均可從AAT Bioquest購買。
實驗方案樣本
以下是我們推薦的將AM酯加載到活細胞中的方案。此協議僅提供指南,應根據您的特定需求進行修改。
1. 在生長培養基中制備細胞過夜。
2. 第二天,將1X Calbryte™ 520 AM工作溶液添加到細胞板中。
注意 如果您的化合物干擾血清,請在上樣染料之前用新鮮的 HHBS 緩沖液替換生長培養基。
3. 將裝載染料的板在37°C的細胞培養箱中孵育30至60分鐘。
注意 孵育染料超過 2 小時可以提高某些細胞系的信號強度。
4. 用您選擇的HHBS或緩沖液(含有陰離子轉運蛋白抑制劑,如1 mM丙磺shu ,如果適用)替換染料工作溶液,以去除任何多余的探針。
5. 根據需要添加 xing fen ji ,并使用配備FITC濾光片組的熒光顯微鏡或包含可編程液體處理系統(如FDSS,FLIPR或FlexStation)的熒光板讀數器同時測量熒光,Ex / Em = 490 / 525 nm截止值515 nm。
產品訂購信息:
20651 Calbryte™ 520 AM 10x50ug